Razones por las que los péptidos son inestables

Reacción de desamidación:En la reacción de desacilación, los residuos de Asn/Gln se hidrolizan para formar Asp/Glu.
Procedimiento de reacción de desamidación no-enzimática. existe Asn-Gly- Los grupos amida en la estructura son más fáciles de hidrolizar, y los grupos amida ubicados en la superficie de la molécula también son más fáciles de hidrolizar que los grupos amida dentro de la molécula.
 

Hay dos razones principales por las que las soluciones de polipéptidos oxidados se oxidan fácilmente.
Primero, hay contaminación por peróxido en la solución.
El segundo es la oxidación espontánea de polipéptidos.
Entre todos los residuos de aminoácidos, Met, Cys e His, Trp, Tyr, etc. son los más susceptibles a la oxidación. La presión parcial de oxígeno, la temperatura y la solución tampón también influyen en la oxidación.

hidrólisis:Los enlaces peptídicos en los polipéptidos se rompen fácilmente mediante hidrólisis. Depende de Asp Los enlaces peptídicos involucrados en la formación se rompen más fácilmente que otros enlaces peptídicos, especialmente los enlaces peptídicos Asp-Pro y Asp-Gly.

Formación de enlaces disulfuro incorrectos:El intercambio entre enlaces disulfuro o entre enlaces disulfuro y grupos sulfhidrilo puede formar enlaces disulfuro incorrectos, lo que resulta en cambios en la estructura terciaria y pérdida de actividad.

Racemizar: eliminar Gly Excepto todos los residuos de aminoácidos. Los átomos de carbono son todos quirales y propensos a reacciones de racemización bajo catálisis básica. en Asp Los residuos son más susceptibles a reacciones de racemización.

-eliminar:-La eliminación se refiere a los residuos de aminoácidos en la eliminación de grupos en átomos de carbono. Cys, Ser, Thr, Phe, Tyr Todos los residuos pueden pasar -Eliminar la degradación.
en PH alcalino es probable que ocurra -La eliminación, la temperatura y los iones metálicos también tienen un impacto.

La desnaturalización, adsorción, agregación o desnaturalización por precipitación están generalmente relacionadas con la destrucción de la estructura terciaria y la estructura secundaria. En estado desnaturalizado, los péptidos suelen ser más susceptibles a reacciones químicas y su actividad es difícil de recuperar. Durante el proceso de desnaturalización de los polipéptidos, primero se forman intermediarios. Por lo general, la solubilidad de los intermedios es baja y son fáciles de agregar y formar agregados, que a su vez forman precipitación visible.
 

1) mutagénesis dirigida al sitio-: La estabilidad de los polipéptidos se puede mejorar mediante medios de ingeniería genética para reemplazar residuos que causan inestabilidad del polipéptido o para introducir residuos que pueden aumentar la estabilidad del polipéptido.

2) modificación química:Existen muchos métodos de modificación química de polipéptidos y el más estudiado es el PEG Grooming. PEG Es un compuesto polimérico-soluble en agua, degradable en el cuerpo y no-tóxico. PEG Después de combinarse con polipéptidos, puede mejorar la solubilidad del polipéptido, ajustar la biocompatibilidad, mejorar la estabilidad térmica, resistir la degradación por proteasas, reducir la antigenicidad y extender la vida media-en el cuerpo. Elegir el método de modificación apropiado y controlar el grado de modificación puede mejorar o mejorar la actividad biológica del producto original.

3) aditivo:La estabilidad de los péptidos se puede mejorar añadiendo aditivos como azúcares, polioles, gelatina, aminoácidos y determinadas sales. Los azúcares y los polioles aumentan la estabilidad del péptido al forzar más moléculas de agua alrededor de la proteína en concentraciones bajas. Durante el proceso de liofilización-, las sustancias-mencionadas anteriormente también pueden reemplazar el agua y formar enlaces de hidrógeno con el polipéptido para estabilizar la conformación natural del polipéptido, y también pueden aumentar la temperatura de transición vítrea del producto-liofilizado. Además, los tensioactivos como SDS, Tween, Pluronic pueden prevenir la adsorción, agregación y precipitación superficial de polipéptidos.

4) Liofilizado-:Una serie de reacciones químicas que ocurren en polipéptidos, como desamidación, -eliminación, hidrólisis, etc., requieren la participación de agua, y el agua también se puede usar como fase móvil para otros reactivos. Además, reducir el contenido de agua puede aumentar la temperatura de desnaturalización del polipéptido. Por tanto, la liofilización mejora la estabilidad de los péptidos.